色譜分析法有很多種類,從不同的角度出發可以有不同的分類方法。
從兩相的狀態分類:
色譜法中,流動相可以是氣體,也可以是液體,由此可分為氣相色譜法(GC)和液相色譜法(LC)。固定相既可以是固體,也可以是涂在固體上的液體,由此又可將氣相色譜法和液相色譜法分為氣-液色譜、氣-固色譜、液-固色譜、液-液色譜。上海液相色譜儀
另外,還有一種超臨界流體色譜法(supercritical fluid chromatography SFC),超臨界流體色譜是指用超臨界流體做流通相,以固體吸附劑(如硅膠)或鍵合到載體(或毛細管壁)上的高聚物為固定相的色譜法。超臨界流體是在高于臨界壓力和臨界溫度時的一種物質狀態,它既不是氣體也不是液體,但兼有氣體和液體的某些性質(藥物色譜分析 主編丁黎 人民衛生出版社2008年7月*版)。
高效液相色譜法(HPLC)是繼氣相色譜之后,70年代初期發展起來的一種以液體做流動相的新色譜技術。上海液相色譜儀
高效液相色譜是在氣相色譜和經典色譜的基礎上發展起來的。現代液相色譜和經典液相色譜沒有本質的區別。不同點僅僅是現代液相色譜比經典液相色譜有較高的效率和實現了自動化 操作。經典的液相色譜法,流動相在常壓下輸送,所用的固定相柱效低,分析周期長。而現代液相色譜法引用了氣相色譜的理論,流動相改為高壓輸送(zui高輸送壓力可達4.9?107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經典液相色譜(每米塔板數可達幾萬或幾十萬);同時柱后連有高靈敏度的檢測器,可對流出物進行連續檢測。因此,高效液相色譜具有分析速度快、分離效能高、自動化等特點。所以人們稱它為高壓、高速、高效或現代液相色譜法。
HPLC 系統一般由高效液相色譜儀主要由進樣系統、輸液系統、分離系統、檢測系統和數據處理系統等組成。
其中高壓、色譜柱、檢測器是關鍵部件。有的儀器還有梯度洗脫裝置、在線脫氣機、自動進樣器、預柱或保護柱、柱溫控制器等,現代 HPLC 儀還有微機控制系統,進行自動化儀器控制和數據處理。制備型 HPLC 儀還備有自動餾分收集裝置。
操作規程
一、液相色譜要放置在平穩牢固的臺面上。
二、液相色譜要有可靠的接地。
三、高壓氣瓶要放置在陰涼、通風處,通過減壓閥和機器連接。
四、使用氫火焰時,應先開助燃氣,后開氫氣,關閉時應先關氫氣,后關助燃氣。注意檢查氫瓶、減壓 閥、連接管線是否泄漏,如有泄漏應立即處理。
五、溫控設備,壓力表應按規定進行檢定。
六、儀器工作室,應放置足夠數量的消防器材。