斑馬魚花生四烯酸5-脂氧合酶(alox5a)elisa檢測試劑盒
用途:科研實(shí)驗(yàn)專用,不得用于臨床診斷,請按說明書嚴(yán)格操作
檢測范圍:BLL102392E
規(guī)格:96T/48T
實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中調(diào)亡蛋白酶因子1(Apaf-1)水平。用純化的調(diào)亡蛋白酶因子1(Apaf-1)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入調(diào)亡蛋白酶因子1(Apaf-1),再與HRP標(biāo)記的調(diào)亡蛋白酶因子1(Apaf-1)抗體結(jié)合,形成抗體抗原酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化
成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的調(diào)亡蛋白酶因子1(Apaf-1)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀
在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中調(diào)亡蛋白酶因子1(Apaf-1)濃度。
需要而未提供的試劑和器材:
37℃恒溫箱。
標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀。
精密移液器及一次性吸頭
蒸餾水,
一次性試管
吸水紙
相關(guān)圖片(1)
標(biāo)本要求 :
1.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
2.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控
制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4.請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于
標(biāo)準(zhǔn)品孔孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍) 后再測定,計(jì)算時(shí)請
后乘以總稀釋倍數(shù)(xnx5)
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
斑馬魚花生四烯酸5-脂氧合酶(alox5a)elisa檢測試劑盒
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